Tối ưu hóa môi trường và điều kiện kich ứng cho E. coli trên hệ thống RoboLector

Trong công nghệ sản xuất protein tái tổ hợp, E. coli được coi là cỗ máy trung tâm quan trọng nhờ đặc điểm dễ cải biến di truyền, khả năng sinh sản nhanh trên nhiều loại cơ chất khác nhau và sản xuất protein với hàm lượng cao. Kết quả sản xuất protein của E. coli phụ thuộc rất nhiều vào thành phần nito, mà đa phần phức tạp rất khác nhau, của môi trường dinh dưỡng và thời điểm kích thích quá trình tích lũy protein.

Với sự trợ giúp của hệ thống RoboLector, nhóm nghiên cứu đã có thể thực hiện được nghiên cứu tối ưu hóa môi trường cũng như thời điểm kích thích vi khuẩn sản xuất protein với hàm lượng cao.

Thí nghiệm được thiết kế với môi trường sử dụng nito từ 6 nguồn dịch chiết nấm men khác nhau của công ty Procelys để đánh giá khả năng sinh trưởng cũng như sản xuất protein tái tổ hợp trên vi khuẩn E. coli.

Kết quả cho thấy với 6 nguồn dịch chiết nấm men khác nhau, tốc độ sinh trưởng vi khuẩn có sự khác biệt rõ. Tuy nhiên quan trọng hơn là ảnh hưởng đến kết quả tạo protein tái tổ hợp.

Nhóm nghiên cứu đã sử dụng protein đánh dấu huỳnh quang có gốc flavin để làm chỉ thị đánh giá này. Quá trình được thử nghiệm trên hệ thống RoboLector với khả năng theo dõi thời gian thực các chỉ số hình thành sinh khối, pH, DO, OD, huỳnh quang và khả năng điều tiết dung dịch, pH. Với sự hỗ trợ của hệ thống, các tác giả đã lập trình cho thời điểm kích thích tạo protein của vi khuẩn thông qua việc bổ sung IPTG với vai trò kích thích quá trình tạo protein. Quá trình này được kích hoạt bằng chỉ số hàm lượng sinh khối vi khuẩn. Khi hàm lượng vi khuẩn tại một vị trí cụ thể đạt ngưỡng để bắt đầu kích thích bằng IPTG thì hệ thống RoboLector sẽ bơm liều IPTG vào môi trường nuôi cấy, làm cho các mẻ nuôi luôn được bắt đầu với cùng mức sinh khối như nhau. Kết quả cho thấy quá trình hoàn thiện protein ở các môi trường sử dụng nguồn nito khác nhau đều không phụ thuộc nồng độ oxy. Quá trình tạo protein có thể được kích thích nhờ IPTG.

Tất cả quá trình thí nghiệm trên hệ thống RoboLector và chỉ gồm 1 đĩa nuôi cấy duy nhất.

Chi tiết:

Khách hàng có nhu cầu cung cấp thông tin chi tiết xin liên hệ: Công ty TNHH Thiết bị khoa học Việt Anh – email: info@vietanhco.com.vn