CORNING MICROCARRIERS: KẾT HỢP ƯU ĐIỂM CỦA NUÔI CẤY BÁM DÍNH VÀ HUYỀN PHÙ ĐỂ MỞ RỘNG QUY MÔ NUÔI CẤY TẾ BÀO GỐC TRUNG MÔ TỪ TỦY XƯƠNG
Microcarriers là các hạt vi mang được sử dụng để nuôi cấy tế bào bám dính không thể thực hiện được bằng phương pháp 2D truyền thống. Microcarrier tối ưu hóa diện tích bề mặt cho tế bào bám dính đồng thời giảm diện tích và thể tích sử dụng. Thông thường, tối ưu hóa quy trình nuôi cấy được thực hiện với quy mô nhỏ trong spinner flask và việc đo lường các thông số được thực hiện ngoại tuyến để theo dõi sự phát triển của tế bào, mức khí, và sự trao đổi chất dinh dưỡng. Điều kiện nuôi cấy được tối ưu cho phép tế bào được phân bố đồng đều trên bề mặt hạt vi mang với sự va đập tối thiểu, đồng thời cho phép trao đổi đầy đủ khí và chất dinh dưỡng.
Corning đã ra mắt sản phẩm thương mại là các hạt vi mang tiện dụng với lớp phủ hóa học bề mặt khác nhau cho những loại tế bào khác nhau. Đối với tế bào gốc trung mô (MSC) đang được ứng dụng rộng rãi, nuôi cấy bằng hạt vi mang thường gặp phải những khó khăn: (1) các tế bào sơ cấp rất nhạy cảm với sự khuấy trộn, đặc biệt trong quá trình gắn kết tế bào; (2) chúng có xu hướng hình thành tập hợp gây nên hiện tượng sóng bề mặt trong quá trình mở rộng. Corning đã phát triển công nghệ khuấy trộn liên tục để mở rộng quy mô sản xuất MSC hiệu quả (>8 lần) và hạn chế sự hình thành sự kết tụ sóng trên bề mặt hạt vi mang trong khi vẫn duy trì được tính đa năng của tế bào. Corning HYPERFlask được sử dụng để mở rộng quy mô nuôi cấy tế bào dựa trên hạt vi mang (hình 1A). Các tế bào được rã đông vào bình T175 sau đó được chuyển sang bình HYPERFlask trước khi được gieo vào bình spinner flask (1L). Phương pháp mở rộng quy mô với hạt vi mang được lặp lại hai lần trên 3 nguồn tế bào từ 3 người hiến tủy xương. Nuôi cấy được thực hiện và mở rộng 9-11 ngày sử dụng khuấy trộn liên lục. Sau đó, các tế bào được đánh giá khả năng sống sót, tổng sản lượng, khả năng duy trì hình thái điển hình, biểu hiện kiểu hình và kiểu nhân.