Nuôi cấy tế bào 2D và 3D cùng Corning Matrigel Matrix

Corning Matrigel Matrix là gì?

Matrigel là một chế phẩm màng đáy hòa tan được tách chiết từ ​​sarcoma chuột Engelbreth-Holm-Swarm (EHS), một khối u giàu protein ECM như laminin (thành phần chính), collagen IV, proteoglycan heparan sulfat, enactin/nidogen, và một số của các yếu tố tăng trưởng.

Ngày nay, hydrogel dựa trên ECM tự nhiên này là một trong những mô hình được sử dụng rộng rãi nhất để nuôi cấy tế bào 2D và 3D trong ống nghiệm, cho phép bạn:

• Cải thiện sự gắn kết và biệt hóa của cả tế bào biểu mô phụ thuộc vào vị trí gắn bình thường và biến đổi, cũng như các loại tế bào khác.
• Tương tự môi trường in vivo tốt hơn cho các ứng dụng nuôi cấy tế bào 2D và 3D.

Tính năng độc đáo của chất nền Matrigel:

• Đã được chứng minh và tin cậy từ năm 1985, là chất nền màng đáy được tham chiếu rộng rãi nhất
• Nhiều lựa chọn màng đáy, được sử dụng trong các ứng dụng đa dạng từ ung thư đến nghiên cứu tế bào gốc, sinh học thần kinh,…
• Được sản xuất theo quy trình kiểm soát chất lượng nghiêm ngặt vượt trên tiêu chuẩn ngành, đảm bảo tính nhất quán của protein và hiệu suất sản phẩm vượt trội
• Xác nhận nghiêm ngặt cho chức năng
• Chứng nhận không chứa LDEV

Ứng dụng

Chất nền Corning Matrigel có hiệu quả đối với sự liên kết và biệt hóa của cả biểu mô phụ thuộc vị trí gắn bình thường và biến đổi và các loại tế bào khác. Bao gồm tế bào thần kinh, tế bào Sertoli, thủy tinh thể gà, tế bào nội mô mạch máu và tế bào gan.

Các ứng dụng bao gồm:

• Ảnh hưởng đến biểu hiện gen trong tế bào gan chuột trưởng thành
• Nuôi cấy 3D trong tế bào biểu mô tuyến vú của chuột và người
• Tái tạo thần kinh ngoại vi in ​​vivo
• Nghiên cứu trao đổi chất và độc tính
• Sự phát triển của một số loại xét nghiệm xâm lấn tế bào khối u
• Nghiên cứu in vitro và in vivo về sự hình thành mạch
• Nhân giống in vivo các khối u ở người ở chuột bị ức chế miễn dịch
• Việc duy trì tế bào gốc phôi người và tế bào gốc đa năng cảm ứng (hiPS)
• Sự biệt hóa tế bào thần kinh của các tế bào hiPS

Lựa chọn ứng dụng

• Công thức chuẩn: Thích hợp để nuôi cấy các tế bào phân cực, chẳng hạn như tế bào biểu mô. Thúc đẩy biệt hóa của nhiều loại tế bào, bao gồm: tế bào gan, tế bào thần kinh, đảo beta, biểu mô tuyến vú, tế bào nội mô và tế bào cơ trơn
• Nồng độ cao (HC): Nồng độ protein cao hơn cung cấp độ cứng của chất nền và tính toàn vẹn của cấu trúc tốt hơn. Thích hợp cho các ứng dụng phân phối tế bào in vivo để cải thiện quá trình cấy ghép tế bào và tăng cường hình thành khối u răn
• Giảm yếu tố tăng trưởng: Thích hợp cho các ứng dụng cần chuẩn bị màng đáy. Có sắn trong các công thức tiêu chuẩn, không chứa Phenol Red và GFR
• Không chứa Phenol Red: Thích hợp cho các xét nghiệm yêu cầu phát hiện màu (ví dụ: so màu, huỳnh quang,…). Có sẵn trong công thức tiêu chuẩn, GFR và HC
• Đạt tiêu chuẩn hESC: Được sàng lọc trước về khả năng tương thích với môi trường mTeSR1 bởi công nghệ tế bào gốc, mang lại khả năng tái tạo và tính nhất quán cần thiết cho phôi người và nuôi cấy tế bào gốc không có chất trung chuyển đa năng cảm ứng.

Kiểm soát chất lượng chất nền Matrigel

• Các đàn chuột thường xuyên được sàng lọc mầm bệnh thông qua xét nghiệm sản xuất kháng thể chuột (MAP)
• Khối u EHS không chứa LDEV (LDEV-free)
• Thử nghiệm PCR mở rộng được thực hiện trên một số mầm bệnh, bao gồm cả LDEV, đảm bảo kiểm soát chặt chẽ nguyên liệu thô được sử dụng trong quá trình sản xuất
• Đã xét nghiệm và phát hiện âm tính với sự hiện diện của vi khuẩn, nấm và mycoplasma
• Nồng độ protein được xác định bằng phương pháp Lowry
• Các đơn vị nội độc tố được đo bằng xét nghiệm Limulus Amoebocyte Lysate
• Độ ổn định của gel được thử nghiệm trong khoảng thời gian 14 ngày ở 37°C
• Hoạt tính sinh học được xác định cho từng lô bằng cách sử dụng xét nghiệm phát triển thần kinh; hạch gốc ở lưng gà con, được phủ trên một lớp chất nền Corning Matrigel 1,0 mm, cần thiết để tạo ra phản ứng phát triển thần kinh dương tính sau 48 giờ mà không cần bổ sung yếu tố tăng trưởng thần kinh.